1.Count值计算的码下几种方式,你会吗
Count值计算的码下几种方式,你会吗
在转录组定量分析领域,码下多种软件提供不同方式来计算转录本表达量。码下其中,码下RSEM、码下vuescript源码eXpress、码下salmoe、码下kallisto、码下featureCounts等软件在网上的码下教程丰富,用户可自行学习。码下本教程推荐使用Stringtie -eB和featureCounts两种方法进行转录本定量分析。码下
Stringtie -eB通过组装后的码下装企源码merge.gtf注释信息与.bam文件进行转录本表达量的比对,获得转录本的码下FPKM值。随后,码下使用Ballgown包进行后续分析。完成此步骤后,每个样本会生成新的.gtf文件。分析过程中,淘宝信誉源码可以结合R语言中的ballgown包进行深入研究。
Stringtie软件附带的prepDE.py程序也是获取转录本丰度的实用工具。与HISAT2+Stringtie+Ballgown组合相比,prepDE.py提供更灵活的下游分析选项,推荐在获取count值后再进行深入分析。
featureCounts是1元购源码subread软件中的脚本,用于在bam文件上进行转录本定量分析。安装方式可选使用conda或源码安装。运行时,建议使用前期使用hisat2、bowtie2、bwa或STAR等软件映射的营销型网站源码bam文件。
HTseq-count是另一个常用的计数软件,与featureCount功能类似。安装和运行HTseq-count软件,可以实现转录本的计数。
对于需要将count值转换为FPKM值的用户,可以使用Perl脚本完成此转换。通过运行Perl脚本进行转换,并使用cut命令提取所需信息。常用的转换脚本为CountToFPKM.pl。
本教程覆盖了转录组定量分析的多种方法,以及相关的软件和工具。除了上述提到的方法,还有其他流程如salmon定量分析,用户可根据需求选择合适的方法。在定量后,通常会生成gene_count_matrix.csv文件,该文件可用于后续的分析。
在进行转录组定量分析时,确保选择合适的软件和参数,以获取准确的转录本表达量。同时,了解不同工具的优缺点,有助于提高分析的效率和准确性。